- 将经电泳分离的抗原提取物转印到膜条上作为固相。抗原的分子量决定其在膜条上的位置。
- 若是阳性，已稀释血清中的特异性抗体将与膜条上的抗原结合。
- 第二步：结合的抗体与碱性磷酸酶（AP）标记的抗人抗体反应。
- 第三步：加入可产生颜色反应的色原/底物溶液温育。若标本中含有待测的特异性抗体，相应的抗原条带将呈现较深的颜色。
- 判断膜条上阳性带的特异性。依据特异性条带的数目和显色深浅判断检测结果的阴阳性。
- EUROLINE-WB：检测抗疏螺旋体抗体
- 每个标本与一条膜条温育。
- 实验时间大约为115分钟。
- 所有的温育步骤均于室温进行。
- 试剂盒提供批特异的参考膜条。对每次电泳凝胶赋予单独的批号以避免错误判断条带。
- 每个试剂盒内有一条相同批号的已与阳性质控血清温育过的膜条。因而实验时无需温育阳性质控血清。
- 膜条已预先编号以防止混淆，不需另外编号。
- 膜条底端的质控带显色表明实验各步操作正确。
- 阴、阳性结果容易区分，抗原带着色的深浅与相应抗体的滴度相关。
- 当用于确认或区分来自筛查检测（间接免疫荧光和ELISA）的阳性结果时，Westernblot是应当选用的方法。
- EUROLINE-WB是免疫印迹法和条带印迹技术的一种组合。用电泳将全抗原提取物按照蛋白的分子量大小分离开，然后再转印到硝酸纤维素膜上（免疫印迹法膜条）。在免疫印迹法实验膜条上还固定了包被有高度纯化的天然或重组抗原的膜条片断（欧蒙印迹法膜条片断）。
- 欧蒙开发的EUROLineScan软件可定量判断实验结果、管理实验数据，并可提供详细的实验报告。首先，用平台式的扫描仪扫描温育过的实验膜条，EUROLineScan可识别膜条的位置（即使膜条放置得不合适也能识别），鉴别阳性带的特异性，并检测阳性带着色的深浅。实验结果可与扫描的图像存储在一起，对每一位患者单独生成一张实验报告单。
